【资料图】
收集培养的病毒：在HCMV病毒感染HFF细胞两周左右，HFF细胞出现明显的形态变化和裂解死亡。用细胞刮刀刮取大瓶底部的HFF细胞，并收集含有病毒的上清；
反复冻融三次：37℃水浴锅融30min，冻30min，融30min，冻30min，融30min，释放HFF细胞内的病毒颗粒；
离心去掉细胞碎片：6000rcf 4℃ 10min离心，吸取上清，弃掉底部的细胞碎片；
超离：用的滤嘴过滤上清，去除可能污染的细菌（HCMV病毒颗粒直径为120～200nm）。首先在超离管中加1ml 20％蔗糖，再加大约30ml的病毒上清，插冰上称重、配平（误差在以内），贝克曼台式超速离心机离心（离心程序20000rpm，1h30min，4℃）
5.重悬病毒：去掉上清，加500ul 5％蔗糖重悬，重悬液加入的EP管，再分装到PCR管，每管20ul，放入-80℃冰箱保存（防止反复冻融）。
关键词：
HCMV病毒纯化流程
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